試卷征集
加入會員
操作視頻

為了研究低溫誘導(dǎo)對某基因的啟動子P活性的影響，科研人員進行了啟動子P的PCR提取、特定表達載體的構(gòu)建和轉(zhuǎn)基因煙草的功能鑒定。該基因及其啟動子P的結(jié)構(gòu)及相應(yīng)限制酶的切割位點如圖1所示，如圖1中灰色區(qū)域堿基序列是已知的，啟動子P（圖中黑色區(qū)域）及上游堿基序列未知，片段I和片段II中的字母A～F均表示引物。請回答下列問題。
菁優(yōu)網(wǎng)
（1）啟動子是
RNA聚合酶識別并結(jié)合
RNA聚合酶識別并結(jié)合
的位點。不能直接根據(jù)片段I擴增啟動子P的原因是
啟動子P及左側(cè)的序列未知，無法合成PCR所需要的引物
啟動子P及左側(cè)的序列未知，無法合成PCR所需要的引物
。
（2）為了能擴增正常啟動子P，科研人員先用
酶1和DNA連接
酶1和DNA連接
酶處理上圖中的片段I，使片段I成為環(huán)狀DNA；再將環(huán)狀DNA用
酶2
酶2
（填“酶1”或“酶2”）處理得到了片段II，如圖2所示。根據(jù)片段II能不能擴增出啟動子P？若能，請寫出可選用的引物組合（用C、D、E、F表示），若不能請說明理由
能，可選用的引物組合是D和E
能，可選用的引物組合是D和E
。
菁優(yōu)網(wǎng)
（3）已知卡那霉素可抑制煙草細胞的生長，基因M可在煙草的根部正常表達，其表達產(chǎn)物可將X-Gluc水解生成藍色物質(zhì)。將啟動子P和基因M結(jié)合并與含有卡那霉素抗性基因的Ti-質(zhì)粒重組構(gòu)建基因表達載體。將表達載體和酚類物質(zhì)混合后加入含有煙草細胞的培養(yǎng)基中，酚類物質(zhì)的作用是
吸引農(nóng)桿菌感染煙草細胞
吸引農(nóng)桿菌感染煙草細胞
。再用含有
卡那霉素
卡那霉素
的培養(yǎng)基篩選出所需的煙草細胞，然后經(jīng)過
組織培養(yǎng)
組織培養(yǎng)
獲得轉(zhuǎn)基因煙草植株。
（4）將上述轉(zhuǎn)基因煙草植株分為A、B兩組，A組在常溫（25℃，對照組）下培養(yǎng)，B組在低溫（4℃，實驗組）下培養(yǎng)，一段時間后取A、B的幼根，浸入適量
X-Gluc
X-Gluc
溶液中，觀察煙草細胞中基因M的表達情況（表達強度越大，細胞表現(xiàn)的藍色越深）。若A、B組的結(jié)果分別為
A藍色較深、B藍色較淺
A藍色較深、B藍色較淺
，則說明低溫抑制啟動子P的功能。

【答案】RNA聚合酶識別并結(jié)合；啟動子P及左側(cè)的序列未知，無法合成PCR所需要的引物；酶1和DNA連接；酶2；能，可選用的引物組合是D和E；吸引農(nóng)桿菌感染煙草細胞；卡那霉素；組織培養(yǎng)；X-Gluc；A藍色較深、B藍色較淺
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：34引用：4難度：0.7
相似題

  • 1．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
    菁優(yōu)網(wǎng)
    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　　）

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7

  • 2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 3．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當復(fù)制模板
    菁優(yōu)網(wǎng)
    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
小程序二維碼
把好題分享給你的好友吧~~
APP開發(fā)者：深圳市菁優(yōu)智慧教育股份有限公司 | 應(yīng)用名稱：菁優(yōu)網(wǎng) | 應(yīng)用版本：4.8.2  |  隱私協(xié)議      第三方SDK     用戶服務(wù)條款廣播電視節(jié)目制作經(jīng)營許可證出版物經(jīng)營許可證網(wǎng)站地圖本網(wǎng)部分資源來源于會員上傳，除本網(wǎng)組織的資源外，版權(quán)歸原作者所有，如有侵犯版權(quán)，請立刻和本網(wǎng)聯(lián)系并提供證據(jù)，本網(wǎng)將在三個工作日內(nèi)改正