閱讀以下材料,完成(1)~(4)題。
葉綠體與細胞核雙定位Y蛋白對于番茄抗低溫的機制分析
番茄易受低溫傷害,導(dǎo)致嚴重減產(chǎn)。我國科研人員從番茄低溫誘導(dǎo)表達數(shù)據(jù)庫中發(fā)現(xiàn)了Y基因,低溫處理使其轉(zhuǎn)錄量升高。Y基因編碼的Y蛋白是植物特有的DNA結(jié)合蛋白,定位于葉綠體和細胞核。4℃低溫處理后,Y基因過表達株系比野生型明顯耐低溫,而敲除Y基因的株系的低溫耐受能力低于野生型。
低溫會導(dǎo)致活性氧(ROS)產(chǎn)生,而大量的ROS會破壞植物細胞光合膜系統(tǒng)。電鏡觀察葉綠
體超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),與野生型相比,低溫處理后Y基因過表達株系的類囊體結(jié)構(gòu)相對完整、葉綠體中淀粉粒數(shù)量少,而敲除Y基因的株系類囊體受損更嚴重且淀粉粒數(shù)量更多??蒲腥藛T對Y蛋白的作用機制進行了研究。
類囊體膜上的光合復(fù)合體PSⅡ是光反應(yīng)中吸收、傳遞并轉(zhuǎn)化光能的重要場所,葉綠體基因編碼的D
1蛋白是PSII的核心蛋白,低溫會破壞D
1蛋白。常溫下Y基因過表達株系中的D
1蛋白含量與野生型相同,而低溫處理下,野生型中D
1蛋白含量下降,Y基因過表達植株的D
1蛋白含量基本保持穩(wěn)定,從而保護了PSⅡ。
I酶和A酶分別參與葉綠體中淀粉的合成與降解。在細胞核中,Y蛋白可通過與兩者啟動子結(jié)合,調(diào)控I酶和A酶基因的轉(zhuǎn)錄,降低低溫下葉綠體中淀粉的積累。
R酶由8個大亞基蛋白和8個小亞基蛋白組成,是CO
2固定過程中的限速酶,對低溫脅迫尤為敏感。小亞基蛋白由S基因編碼,S基因過表達植株與野生型相比,低溫下R酶含量更高且耐低溫能力更強。研究還發(fā)現(xiàn),Y蛋白能夠與S基因的啟動子結(jié)合并增強其轉(zhuǎn)錄,從而在低溫脅迫下維持R酶的含量。
農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,Y基因的發(fā)現(xiàn)及其調(diào)控機制的研究,為增強冷敏感作物的低溫抗性提供了有效途徑。
(1)低溫導(dǎo)致番茄細胞產(chǎn)生大量的
ROS
ROS
破壞葉綠體類囊體膜,影響光反應(yīng)的進行,為碳反應(yīng)提供的
ATP和NADPH([H])
ATP和NADPH([H])
減少,降低了植物光合速率。據(jù)文中信息,低溫下Y基因過表達植株有利于光反應(yīng)進行的直接原因有
Y基因過表達植株葉綠體的類囊體結(jié)構(gòu)相對完整;低溫下Y基因過表達植株的D1蛋白含量穩(wěn)定,從而保護了PSⅡ
Y基因過表達植株葉綠體的類囊體結(jié)構(gòu)相對完整;低溫下Y基因過表達植株的D1蛋白含量穩(wěn)定,從而保護了PSⅡ
。
(2)為研究Y蛋白在低溫脅迫下維持D
1蛋白含量穩(wěn)定的機制,科研人員進行了如表實驗:
實驗材料 |
實驗處理 |
檢測指標 |
實驗結(jié)果 |
Y基因過表達植株及野生型 |
施加硫酸鏈霉素(可抑制葉綠體編碼的基因翻譯)后,低溫處理 |
D1蛋白含量 |
Y基因過表達植 D1蛋白含量基本等于 D1蛋白含量基本等于 野生型 |
低溫處理 |
與D1蛋白降解相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄量 |
Y基因過表達植株 與D1蛋白降解相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄量基本等于 與D1蛋白降解相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄量基本等于 野生型 |
結(jié)果說明在番茄中過量表達Y基因增加了D
1蛋白的合成,而未減少D
1蛋白降解。請在表格I、Ⅱ處將實驗結(jié)果補充完整。
(3)葉綠體中淀粉粒的積累會抑制光合作用。根據(jù)Y蛋白功能特點,結(jié)合文中信息,推測細胞核中的Y蛋白低溫下減少葉綠體中淀粉積累的具體機制:
細胞核中Y蛋白可與編碼I酶和A酶基因的啟動子結(jié)合,抑制編碼Ⅰ酶基因轉(zhuǎn)錄,促進編碼A酶的基因轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致Ⅰ酶減少、A酶增加,從而使淀粉合成減少,分解增多,降低葉綠體中淀粉的積累
細胞核中Y蛋白可與編碼I酶和A酶基因的啟動子結(jié)合,抑制編碼Ⅰ酶基因轉(zhuǎn)錄,促進編碼A酶的基因轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致Ⅰ酶減少、A酶增加,從而使淀粉合成減少,分解增多,降低葉綠體中淀粉的積累
。
(4)R酶在
葉綠體基質(zhì)
葉綠體基質(zhì)
(場所)中催化CO
2與RuBP(C
5)結(jié)合,生成2分子
C3
C3
。如圖為野生型、Y基因過表達及敲除植株,4℃處理12小時后在一定光照強度下測定的凈光合速率。下列相關(guān)分析合理的包括
ABDE
ABDE
。
A.Y基因過表達植株的CO
2飽和點大于野生型
B.CO
2濃度在100~200μmol?mol
-1之間時,三組植株凈光合速率隨CO
2濃度的增加而升高
C.CO
2濃度等于250μmol?mol
-1時,若突然增大光強,葉綠體內(nèi)C
5將減少
D.CO
2濃度大于250μmol?mol
-1時,限制野生型和Y基因敲除植株凈光合速率增加的環(huán)境因素可能是光強
E.低溫下Y基因過表達植株R酶的小亞基蛋白含量高,固定CO
2能力強于野生型