某研究小組計劃通過多聚酶鏈式反應(yīng)(PCR)擴增目的基因并用于構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌,其擴增過程示意圖如下?;卮鹣铝袉栴}:
(1)圖中“?”代表的溫度約為 5050℃。步驟1的目的是 使模板DNA的雙鏈解聚使模板DNA的雙鏈解聚。
(2)PCR過程中需要使用的酶是 耐高溫的DNA聚合酶耐高溫的DNA聚合酶,和人體內(nèi)同種功能的酶相比,該酶的顯著特點是 可以在高溫條件下正常發(fā)揮酶的催化作用可以在高溫條件下正常發(fā)揮酶的催化作用。
(3)設(shè)計一對與MT基因兩端序列互補配對的引物(引物1和引物2),設(shè)計引物時需要避免引物之間形成 氫鍵氫鍵,而造成引物自連。若將一個目的基因通過PCR過程共進行5輪循環(huán),則有 3131條DNA單鏈含引物1(或引物2)。
(4)PCR擴增時,復(fù)性溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。復(fù)性溫度過高會破壞 引物與模板引物與模板的堿基配對。復(fù)性溫度的設(shè)定與引物長度、堿基組成有關(guān),長度相同但 G、CG、C堿基含量高的引物需要設(shè)定相對更高的復(fù)性溫度。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】50;使模板DNA的雙鏈解聚;耐高溫的DNA聚合酶;可以在高溫條件下正常發(fā)揮酶的催化作用;氫鍵;31;引物與模板;G、C
【解答】
【點評】
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