研究證實，人低氧誘導(dǎo)因子（HIF-1a）表達水平與肝癌的發(fā)生發(fā)展具有密切關(guān)系，HIF-1a在肝癌細胞中的表達水平明顯高于正常肝細胞的。CRISPR/Ccs9基因編輯技術(shù)是通過人工設(shè)計的sgRNA（向?qū)NA）來識別目的基因組序列，并引導(dǎo)Cas9蛋白酶進行有效切割目的DNA雙鏈。形成雙鏈斷裂，而在細胞自我修復(fù)過程中通常會發(fā)生堿基插入或缺失的錯配現(xiàn)象等，最終干擾基因組DNA的表達。使用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)敲除HIF-1a基因可以為肝癌治療提供新途徑?；卮鹣铝袉栴}：
（1）由題意可知，Cas9蛋白酶很可能作用于DNA的

磷酸二酯鍵

磷酸二酯鍵

部位造成了雙鏈斷裂，其作用效果類似于基因工程中的

限制（或限制性內(nèi)切核酸）

限制（或限制性內(nèi)切核酸）

酶。CRISPR/Cas9）基因編輯技術(shù)往往會導(dǎo)致細胞中發(fā)生

基因突變

基因突變

（填變異類型），從而干擾了目的基因的表達。
（2）科研人員構(gòu)建了靶向HIF-1a基因的CRISPR/Cas9重組質(zhì)粒，并用重組質(zhì)粒通過

顯微注射

顯微注射

法對肝癌細胞進行轉(zhuǎn)染，利用其敲除肝癌細胞中的HIF-1a基因?？赏ㄟ^

測量目的細胞中低氧誘導(dǎo)因子（HIF-1a）的含量

測量目的細胞中低氧誘導(dǎo)因子（HIF-1a）的含量

來檢測CRISPR/Cas9基因是否在目的細胞中發(fā)揮作用。
（3）為檢測Cas9蛋白酶對HIF-1a基因的敲除效果，取基因敲除的肝癌細胞和等量的普通肝癌細胞，然后用生理鹽水配制的HIF-1a表達誘導(dǎo)劑（CoCl₂）誘導(dǎo)相關(guān)細胞并檢測HIF-1a蛋白的表達，檢測結(jié)果如下表所示，已知甲、乙、丙、丁均為HIF-1a蛋白的表達量。分析下表并回答下列問題：

分類	普通肝癌細胞	基因敲除的肝癌細胞
加入HIF-1a表達誘導(dǎo)劑	甲	乙
____________	丙	丁

表格中的處理方式為

加入等量的生理鹽水

加入等量的生理鹽水

。若Cas9蛋白酶對HIF-la基因進行了完全敲除，則甲、乙之間的大小關(guān)系為

甲＞乙

甲＞乙

（用“＞”“＜”或“=”表示）。