大腸桿菌pUC18質粒是基因工程中常用的運載體。某限制酶在此質粒上的唯一酶切位點位于LacZ基因中，如果沒有插入外源基因，LacZ基因便可表達出口一半乳糖苷酶。當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時，X-gal便會被β一半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落。反之，則形成白色菌落。下圖表示利用此質粒實施基因工程的主要流程。
請分析并回答：
（1）已獲得的目的基因可利用 PCRPCR技術進行擴增。
（2）目的基因插入質粒構建重組質粒的過程中，需要DNA連接酶恢復 磷酸二酯磷酸二酯鍵。
（3）將試管I中的物質和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是 進行轉化進行轉化；大腸桿菌需事先用Ca2+進行處理，目的是 使大腸桿菌細胞處于感受態(tài)使大腸桿菌細胞處于感受態(tài)。
（4）將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)基中應含有大腸桿菌必需的營養(yǎng)物質包括 碳源、氮源、無機鹽、水碳源、氮源、無機鹽、水和生長因子，還應加入IPTG、X-gal以及氨芐青霉素，其中加入氨芐青霉素的作用是篩選出 導入pUC18質粒的大腸桿菌導入pUC18質粒的大腸桿菌。
（5）若觀察到培養(yǎng)基上出現(xiàn) 白白色菌落，則說明大腸桿菌中已成功導入了重組質粒。如果作為受體細胞的大腸桿菌也含有LacZ基因，則不利于重組質粒的篩選，原因是 無論大腸桿菌是否導入重組質粒，均會呈現(xiàn)藍色菌落無論大腸桿菌是否導入重組質粒，均會呈現(xiàn)藍色菌落。
【答案】PCR；磷酸二酯；進行轉化；使大腸桿菌細胞處于感受態(tài)；碳源、氮源、無機鹽、水；導入pUC18質粒的大腸桿菌；白；無論大腸桿菌是否導入重組質粒，均會呈現(xiàn)藍色菌落
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：77引用：11難度：0.5
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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