人乳頭狀瘤病毒( HPV)與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān),抗HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測出HPV,從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生,以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程,請據(jù)圖回答:
(1)上述單克隆抗體制備過程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合。
(2)雜交瘤細(xì)胞中染色體數(shù)目與普通淋巴細(xì)胞相比具有的特點(diǎn)是 染色體數(shù)目加倍染色體數(shù)目加倍,在HAT培養(yǎng)基上存活的細(xì)胞可能包括 ①②③①②③(填下列序號)
①無抗體分泌的細(xì)胞 ②抗HPV抗體的分泌細(xì)胞 ③其它無關(guān)抗體的分泌細(xì)胞
(3)對于抗體檢測呈 陽陽性的雜交克隆應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀釋法,即稀釋細(xì)胞到3~10個(gè)細(xì)胞/mL,每孔加入細(xì)胞稀釋液 0.10.1 mL(0.1/1/10),使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞,達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。
(4)由上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體,理由是 因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對人體來說是抗原,存在著排異反應(yīng)因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對人體來說是抗原,存在著排異反應(yīng)。
(5)科學(xué)家從某些無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出了無限增殖調(diào)控基因(prG),該基因能激發(fā)動(dòng)物細(xì)胞分裂,這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的一種制備單克隆抗體技術(shù)外,請?jiān)俸喴獙懗鲆环N制備單克隆抗體的思路 通過基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG、利用核移植技術(shù)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無限增殖細(xì)胞中通過基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG、利用核移植技術(shù)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無限增殖細(xì)胞中。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合;染色體數(shù)目加倍;①②③;陽;0.1;因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對人體來說是抗原,存在著排異反應(yīng);通過基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG、利用核移植技術(shù)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無限增殖細(xì)胞中
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/8/9 8:0:9組卷:20引用:5難度:0.5
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1.為實(shí)現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
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發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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