當(dāng)前位置： 2020-2021學(xué)年黑龍江省大慶中學(xué)高二（上）期末生物試卷> 試題詳情

普通番茄細(xì)胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制細(xì)胞產(chǎn)生多聚半乳糖醛酸酶，該酶能破壞細(xì)胞壁，使番茄軟化，不耐貯藏?？茖W(xué)家將抗多聚半乳糖醛酸酶基因?qū)敕鸭?xì)胞，培育出了抗軟化、保鮮時(shí)間長(zhǎng)的轉(zhuǎn)基因番茄。目的基因和質(zhì)粒（含卡那霉素抗性基因Km^R）上有 PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ四種限制酶切割位點(diǎn)，操作流程如下圖所示。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：

（1）本實(shí)驗(yàn)的目的基因指的是
抗多聚半乳糖醛酸酶基因
抗多聚半乳糖醛酸酶基因
，在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，為了確保目的基因和質(zhì)粒定向連接，應(yīng)該選用的限制酶是
SmaⅠ和PstⅠ
SmaⅠ和PstⅠ
。若用 PstⅠ和AluⅠ切割重組質(zhì)粒，則完全酶切后將會(huì)出現(xiàn)
3
3
個(gè)序列不同的DNA片段。
（2）要利用培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入目的基因的番茄細(xì)胞，培養(yǎng)基中應(yīng)加入
卡那霉素
卡那霉素
。圖中步驟①→②所示技術(shù)的生物學(xué)原理是
細(xì)胞的全能性
細(xì)胞的全能性
。
（3）據(jù)圖中轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞中的信息傳遞過(guò)程可知，由于
mRNA1和mRNA2相結(jié)合
mRNA1和mRNA2相結(jié)合
而直接阻礙了多聚半乳糖醛酸酶基因表達(dá)時(shí)的
翻譯
翻譯
過(guò)程，最終使番茄獲得抗軟化的性狀。
（4）如果利用上述方法培育出的番茄不具抗軟化性狀，經(jīng)分子雜交技術(shù)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)有目的基因存在，但檢測(cè)不到mRNA1分子，可能原因是目的基因上游缺少
啟動(dòng)子
啟動(dòng)子
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．

【答案】抗多聚半乳糖醛酸酶基因；SmaⅠ和PstⅠ；3；卡那霉素；細(xì)胞的全能性；mRNA1和mRNA2相結(jié)合；翻譯；啟動(dòng)子

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：5引用：2難度：0.7

相似題

1．限制酶a、限制酶b能將某線(xiàn)性DNA分子片段切割，其識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?/h2>

A．限制酶a與限制酶b發(fā)揮作用的化學(xué)鍵完全相同

B．限制酶a與限制酶b切出的黏性末端能相互連接

C．所有限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的序列都由6個(gè)核苷酸組成

D．限制酶將該DNA分子切成2個(gè)片段需消耗2個(gè)水分子

發(fā)布：2024/11/10 15:30:3組卷：21引用：5難度：0.7

解析

2．中國(guó)甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關(guān)鍵酶基因（PDC）密切相關(guān)，推測(cè)澀味程度可能與PDC基因的表達(dá)情況有關(guān)。
（1）啟動(dòng)子位于基因首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，同時(shí)啟動(dòng)子區(qū)域還存在著許多調(diào)控蛋白的結(jié)合位點(diǎn)，RNA聚合酶和調(diào)控蛋白共同影響了基因的

。
（2）為篩選PDC基因的調(diào)控蛋白，科研人員進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)。
①PDC基因的啟動(dòng)子序列未知，為獲得大量該基因啟動(dòng)子所在片段，可利用限制酶將基因組DNA進(jìn)行酶切，然后在

的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游，根據(jù)

和PDC基因編碼序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR.利用質(zhì)粒A（圖1）構(gòu)建含有PDC基因啟動(dòng)子片段的重組質(zhì)粒并導(dǎo)入代謝缺陷型酵母菌，用不含

的培養(yǎng)基可篩選出成功轉(zhuǎn)化的酵母菌Y1H。

②質(zhì)粒G（圖2）上的AD基因表達(dá)出的AD蛋白與啟動(dòng)子足夠靠近時(shí)，能夠激活后續(xù)基因轉(zhuǎn)錄，因此需獲得待測(cè)蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選?？蒲腥藛T從中國(guó)甜柿中提取RNA，將逆轉(zhuǎn)錄形成的各種cDNA與質(zhì)粒G連接后導(dǎo)入酵母菌，此時(shí)應(yīng)選擇質(zhì)粒G中的位點(diǎn)

（填序號(hào)1～5）作為cDNA的插入位點(diǎn)，最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
③重組酵母Y187與Y1H能夠進(jìn)行接合生殖，形成的接合子含有兩種酵母菌質(zhì)粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔(dān)子素的培養(yǎng)基中生存，則推測(cè)待測(cè)蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白，請(qǐng)結(jié)合圖示闡述作出該推測(cè)的理由。
發(fā)布：2024/11/11 0:0:2組卷：82引用：2難度：0.7
解析

3．某一質(zhì)粒載體如圖甲所示，Amp^r表示氨芐青霉素抗性基因，Tet^t表示四環(huán)素抗性基因。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后，與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化后得到多種大腸桿菌，并利用培養(yǎng)基乙和丙篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌。下列敘述錯(cuò)誤的是（　　）

A．圖甲所示的質(zhì)粒中還應(yīng)含有復(fù)制原點(diǎn)和終止子等結(jié)構(gòu)

B．將經(jīng)轉(zhuǎn)化處理后的大腸桿菌菌液接種至培養(yǎng)基乙使用的是稀釋涂布平板法

C．配制培養(yǎng)基乙時(shí)應(yīng)加入青霉素

D．培養(yǎng)基丙中生長(zhǎng)的菌落即為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌

發(fā)布：2024/11/10 9:0:1組卷：59引用：4難度：0.6

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1．限制酶a、限制酶b能將某線(xiàn)性DNA分子片段切割，其識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>

1．限制酶a、限制酶b能將某線(xiàn)性DNA分子片段切割，其識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?/h2>