圖(a)中的三個DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性內切酶的識別序列與切割位點,圖(b)為某種表達載體示意圖(載體上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點是唯一的)
根據(jù)基因工程的有關知識,回答下列問題:
(1)經(jīng)BamHⅠ酶切割得到的目的基因可以與上述表達載體被 Sau3AISau3AI酶切后的產(chǎn)物連接,理由是 兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端。
(2)若某人利用圖(b)所示的表達載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子,如圖(c)所示。這三種重組子中,不能在宿主細胞中表達目的基因產(chǎn)物的有 甲、丙甲、丙,不能表達的原因是 甲中目的基因插入在啟動子的上游,丙中目的基因插入在終止子的下游,二者的目的基因均不能被轉錄甲中目的基因插入在啟動子的上游,丙中目的基因插入在終止子的下游,二者的目的基因均不能被轉錄。
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有 E?coliDNA連接酶E?coliDNA連接酶和 T4DNA連接酶T4DNA連接酶,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是 T4DNA連接酶T4DNA連接酶。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】Sau3AI;兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端;甲、丙;甲中目的基因插入在啟動子的上游,丙中目的基因插入在終止子的下游,二者的目的基因均不能被轉錄;E?coliDNA連接酶;T4DNA連接酶;T4DNA連接酶
【解答】
【點評】
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