圖(a)中的三個(gè)DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性內(nèi)切酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn),圖(b)為某種表達(dá)載體示意圖(載體上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點(diǎn)是唯一的)
根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí),回答下列問(wèn)題:
(1)經(jīng)BamHⅠ酶切割得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被
Sau3AI
Sau3AI
酶切后的產(chǎn)物連接,理由是 兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端
兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端
。
(2)若某人利用圖(b)所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子,如圖(c)所示。這三種重組子中,不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有 甲、丙
甲、丙
,不能表達(dá)的原因是 甲中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游,丙中目的基因插入在終止子的下游,二者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄
甲中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游,丙中目的基因插入在終止子的下游,二者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄
。
(3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有 E?coliDNA連接酶
E?coliDNA連接酶
和 T4DNA連接酶
T4DNA連接酶
,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是 T4DNA連接酶
T4DNA連接酶
。