干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫病，其血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體異性最強(qiáng)，影響最顯著?？蒲腥藛T為建立抗SSB抗體全自動(dòng)定量檢測的磁微粒化學(xué)發(fā)光試劑，利用基因工程技術(shù)獲得重組SSB蛋白，流程如圖，請(qǐng)分析回答：
（1）利用RNA通過①過程獲得cDNA需要 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶。通過PCR技術(shù)擴(kuò)增SSB基因的前提是要測定該基因兩端部分核苷酸序列，目的是 便于合成引物便于合成引物。
（2）為確保與PET41a質(zhì)粒定向連接，獲得的SSB基因兩端要含有 BamHI和XhoⅠBamHI和XhoⅠ酶切位點(diǎn)。在PCR過程中，第 三三輪循環(huán)產(chǎn)物中出現(xiàn)含所需限制酶的片段A。
（3）獲得含SSB基因的重組質(zhì)粒后，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)切割原質(zhì)粒和重組質(zhì)粒，獲得片段大小如下表（1kb=1000堿基對(duì)）（注意：DNA片段大小與圖中所畫比例一致）。SSB基因的長度為 3kb3kb。
| 限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ和XhoⅠ |
| 原質(zhì)粒 | 8.1kb | 2.7kb、5.4kb |
| 重組質(zhì)粒 | 3.4kb、5.0kb | 未做該處理 |
卡那霉素
卡那霉素
的培養(yǎng)基上，收集菌落進(jìn)行鑒定，將陽性菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理，篩選得到重組SSB蛋白。（5）為檢測重組質(zhì)粒表達(dá)情況及重組蛋白與抗體結(jié)合能力，科研人員通過注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完成下表：
| 實(shí)驗(yàn)步驟 | 實(shí)驗(yàn)操作 |
| 分組 | 取健康、生理狀態(tài)相同的小鼠隨機(jī)均分成兩組。 |
| 實(shí)驗(yàn)處理 | 實(shí)驗(yàn)組注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑，對(duì)照組① 注射等量不含重組SSB蛋白的弗氏佐劑 注射等量不含重組SSB蛋白的弗氏佐劑 ，連續(xù)三次。 |
| 飼養(yǎng) | 在相同且適宜環(huán)境中飼養(yǎng)。 |
| ② 檢測（獲取實(shí)驗(yàn)結(jié)果） 檢測（獲取實(shí)驗(yàn)結(jié)果） |
第三次免疫后第七天取小鼠血清并提取抗體進(jìn)行檢測。 |
| 結(jié)果分析 | 與對(duì)照組相比，若抗體檢測呈③ 陽性 陽性 ，則表明重組SSB蛋白具有與相應(yīng)抗體高度結(jié)合的能力。 |
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；便于合成引物；BamHI和XhoⅠ；三；3kb；卡那霉素；注射等量不含重組SSB蛋白的弗氏佐劑；檢測（獲取實(shí)驗(yàn)結(jié)果）；陽性
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：25引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7