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新冠疫苗有很多種,我國科學(xué)家團隊研發(fā)的腺病毒載體重組新冠疫苗是一種基因工程疫苗,具體構(gòu)建過程如下圖所示,請回答下列有關(guān)問題。
(1)構(gòu)建腺病毒表達載體,需要S蛋白基因、復(fù)制原點、標(biāo)記基因、
啟動子
啟動子
、
終止子
終止子
等組件。
(2)圖中4種限制酶切割位點識別序列如圖1所示,構(gòu)建腺病毒表達載體時需要使用限制酶
NcoI
NcoI
BamHI
BamHI
切割腺病毒基因和新冠病毒S蛋白基因。

限制酶 NcoⅠ SphⅠ NheⅠ BamHⅠ
識別序列和切割位點 C↓CATGG GCATG↓C GCTAGC G↓GATCC
(3)針對新冠病毒目前常用“熒光RT—PCR技術(shù)”進行檢測,方法是取被檢測者的mRNA在試劑盒中逆轉(zhuǎn)錄出cDNA,并大量擴增,同時利用盒中熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針來檢測PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA,在檢測過程中,隨著PCR的進行,反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,熒光信號不斷增強,如圖2。
①理論上,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說明檢測結(jié)果呈
陽性
陽性
,但為了保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般要達到或超過
閾值
閾值
時才確診。現(xiàn)有甲、乙兩個待檢樣本,檢測時都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線,但甲的a點比乙的a點明顯左移,請給這種結(jié)果做出科學(xué)合理的解釋(試劑盒合格且正常,操作過程規(guī)范且準(zhǔn)確):
甲樣本中的新冠病毒含量更高,達到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
甲樣本中的新冠病毒含量更高,達到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
。
②平臺期出現(xiàn)的原因是
試劑盒中的原料(引物、探針等)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加
試劑盒中的原料(引物、探針等)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加
。
③雖然熒光RT一PCR是當(dāng)前被廣泛認可的檢測手段之一,但是不斷有“假陰性”現(xiàn)象報道,通過上述過程分析“假陰性”的可能原因有
abc
abc
(填字母)。
a.通過咽拭子取樣不規(guī)范或取樣所獲樣本量不足
b.在樣本運輸、檢測中出現(xiàn)了損壞和污染
c.病毒相應(yīng)關(guān)鍵序列發(fā)生了基因突變

【答案】啟動子;終止子;NcoI;BamHI;陽性;閾值;甲樣本中的新冠病毒含量更高,達到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少;試劑盒中的原料(引物、探針等)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加;abc
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:2引用:2難度:0.5
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     

    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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