新冠疫苗有很多種,我國科學(xué)家團隊研發(fā)的腺病毒載體重組新冠疫苗是一種基因工程疫苗,具體構(gòu)建過程如下圖所示,請回答下列有關(guān)問題。
(1)構(gòu)建腺病毒表達載體,需要S蛋白基因、復(fù)制原點、標(biāo)記基因、啟動子啟動子、終止子終止子等組件。
(2)圖中4種限制酶切割位點識別序列如圖1所示,構(gòu)建腺病毒表達載體時需要使用限制酶 NcoINcoI和 BamHIBamHI切割腺病毒基因和新冠病毒S蛋白基因。
限制酶 | NcoⅠ | SphⅠ | NheⅠ | BamHⅠ |
識別序列和切割位點 | C↓CATGG | GCATG↓C | GCTAGC | G↓GATCC |
①理論上,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說明檢測結(jié)果呈
陽性
陽性
,但為了保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般要達到或超過 閾值
閾值
時才確診。現(xiàn)有甲、乙兩個待檢樣本,檢測時都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線,但甲的a點比乙的a點明顯左移,請給這種結(jié)果做出科學(xué)合理的解釋(試劑盒合格且正常,操作過程規(guī)范且準(zhǔn)確):甲樣本中的新冠病毒含量更高,達到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
甲樣本中的新冠病毒含量更高,達到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
。②平臺期出現(xiàn)的原因是
試劑盒中的原料(引物、探針等)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加
試劑盒中的原料(引物、探針等)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加
。③雖然熒光RT一PCR是當(dāng)前被廣泛認可的檢測手段之一,但是不斷有“假陰性”現(xiàn)象報道,通過上述過程分析“假陰性”的可能原因有
abc
abc
(填字母)。a.通過咽拭子取樣不規(guī)范或取樣所獲樣本量不足
b.在樣本運輸、檢測中出現(xiàn)了損壞和污染
c.病毒相應(yīng)關(guān)鍵序列發(fā)生了基因突變
【考點】基因工程的操作過程綜合;DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】啟動子;終止子;NcoI;BamHI;陽性;閾值;甲樣本中的新冠病毒含量更高,達到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少;試劑盒中的原料(引物、探針等)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加;abc
【解答】
【點評】
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