1.人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價值。科研人員通過生物工程技術獲得轉HSA 基因奶牛,并通過乳腺生物反應器生產(chǎn)HSA,其主要技術流程如圖1所示。請分析并回答下列問題:
(1)圖1中為獲取大量的去核卵母細胞,往往需對相應母牛使用
處理,使其超數(shù)排卵,收集并選取處在
時期的卵母細胞,通過顯微操作去除細胞核。供核的牛胎兒成纖維細胞通常選用傳代 10 代以內(nèi)的細胞,其原因是
。
(2)胚胎移植時,為使代孕母牛能處于適合的生理狀態(tài),需要用激素對其進行
處理。為獲得更多轉基因母牛,可在胚胎移植前對胚胎進行
。
(3)SRY-PCR法性別鑒定的基本程序是:提取牛胎兒成纖維細胞的DNA,經(jīng)PCR 反應體系擴增SRY基因(Y 染色體上特有的性別決定基因)片段,然后對擴增產(chǎn)物進行檢測。
①PCR反應體系中通常含有模板DNA、引物、Taq酶、
、緩沖液等。根據(jù)SRY基因序列設計的引物長度一般為20~24個核苷酸,其不宜過短的原因主要是
,兩種引物中G+C的含量相差不宜過大,原因主要是
。
②PCR 一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為變性、
和延伸三步。在循環(huán)之前,常要進行一次預變性,其目的是
。
③細胞核內(nèi)DNA的復制過程如圖2 所示,其中有一條子鏈是先合成短的脫氧核苷酸鏈片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,而在PCR過程中無岡崎片段形成的原因是
。
④若擴增產(chǎn)物含大量SRY基因片段,則該種牛胎兒成纖維細胞
(填“能”或“不能”)用作技術流程中轉化過程的受體細胞。