M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細(xì)胞中特異性表達?，F(xiàn)設(shè)計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示。分析回答：

（1）過程①當(dāng)在無菌無毒的環(huán)境中培養(yǎng)細(xì)胞至出現(xiàn)

接觸抑制

接觸抑制

現(xiàn)象時，需要對其進行分瓶處理。為保證環(huán)境無毒，應(yīng)采取的措施是

對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理，通常在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物

對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理，通常在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物

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（2）過程②為顯微操作去核過程，去除的“核”其實是

細(xì)胞核和第一極體

細(xì)胞核和第一極體

結(jié)構(gòu)；與原生質(zhì)體融合相比，過程③特有的誘導(dǎo)融合方法是

用滅活的病毒誘導(dǎo)

用滅活的病毒誘導(dǎo)

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（3）為獲得更多的克隆動物A.可在過程⑤胚胎移植前對胚胎進行分割，分割囊胚時，要注意

均等分割內(nèi)細(xì)胞團

均等分割內(nèi)細(xì)胞團

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（4）鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路：

用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出雜交瘤細(xì)胞，利用抗原—抗體雜交技術(shù)，檢測篩選出的雜交瘤細(xì)胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體。如果不能產(chǎn)生，說明M基因在克隆動物A中已失活，如果能產(chǎn)生，說明M基因在克隆動物A中沒有失活

用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出雜交瘤細(xì)胞，利用抗原—抗體雜交技術(shù)，檢測篩選出的雜交瘤細(xì)胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體。如果不能產(chǎn)生，說明M基因在克隆動物A中已失活，如果能產(chǎn)生，說明M基因在克隆動物A中沒有失活

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