重疊延伸PCR技術(shù)是常規(guī)PCR技術(shù)的衍生，它依據(jù)需要連接的基因中核苷酸序列（或基因片段）設(shè)計出多對具有互補末端的引物，先分段對模板進行擴增，再將PCR產(chǎn)物混合，其中的重疊鏈將相互搭橋、互為模板而延伸，最終實現(xiàn)不同來源的擴增片段重疊拼接起來的目的，如圖1所示。請分析并回答下列問題：
（1）圖1中的過程②在 22個反應(yīng)體系中進行，原因是 引物互補影響PCR結(jié)果引物互補影響PCR結(jié)果。經(jīng)過程②后，體系中存在不同長度的DNA片段，獲取所需DNA的方法是 瓊脂糖凝膠電泳分離瓊脂糖凝膠電泳分離。①中引物2和引物3的游離部分分別與 外顯子B、外顯子A外顯子B、外顯子A的部分序列同源。
（2）圖1中的過程⑥不需要不需要（填“需要”或“不需要”）另加引物，原因是 兩條DNA的交錯部分即可作為其延伸的引物兩條DNA的交錯部分即可作為其延伸的引物。進行②⑥⑧⑩過程時，需要在一定的緩沖溶液中進行，⑩過程除圖示條件還需要加入 四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶。
（3）重疊延伸PCR技術(shù)可用于基因的定點突變?；蚨c突變是根據(jù)目的基因（如圖2蛋白A基因）的序列，設(shè)計4條單鏈核苷酸片段為引物（圖2中的引物A→D），原理是取引物A、B進行PCR1反應(yīng)，以及引物C、D進行PCR2反應(yīng)，然后將需要的兩個片段混合、延伸并大量擴增。圖2引物B和引物C中的“∧”代表 突變堿基突變堿基，引物B和引物C堿基序列間存在的關(guān)系是 互補互補。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定；目的基因的篩選與獲取．
【答案】2；引物互補影響PCR結(jié)果；瓊脂糖凝膠電泳分離；外顯子B、外顯子A；不需要；兩條DNA的交錯部分即可作為其延伸的引物；四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶；突變堿基；互補
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：23引用：2難度：0.7
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c突變的DNA構(gòu)建基因表達載體，常用將基因表達載體導(dǎo)入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為?？蒲腥藛T通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募毎酥?，?jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細胞內(nèi)是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞進行核移植（克?。?，可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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