中國農(nóng)業(yè)大學(xué)國家玉米改良中心采用基因工程技術(shù)將從A生物分離出的抗蟲基因?qū)胗衩准?xì)胞,培育出的抗蟲玉米ND207能夠抗玉米螟、黏蟲、棉鈴蟲等玉米主要鱗翅目害蟲,并能有效減輕草地貪夜蛾帶來的危害?;卮鹣铝袉栴}。
基因工程的操作程序主要包括四個步驟:
(1)第一步:
目的基因的獲取
目的基因的獲取
。人從蘇云金芽孢桿菌中切割抗蟲基因所用的工具是限制酶,主要存在于
原核生物
原核生物
中,其特點是
能識別特定的脫氧核苷酸序列并在特定位點切斷DNA
能識別特定的脫氧核苷酸序列并在特定位點切斷DNA
。
(2)第二步:
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
。一個基因表達(dá)載體的組成,除了目的基因外,還必須有啟動子、
終止子
終止子
以及標(biāo)記基因。標(biāo)記基因的作用是
重組DNA的鑒定和選擇(鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,并加以篩選)
重組DNA的鑒定和選擇(鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,并加以篩選)
。
(3)第三步:
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用的方法是
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞采用最多的方法是
顯微注射法
顯微注射法
;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛,大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是:先用
鈣離子(氯化鈣)
鈣離子(氯化鈣)
處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收環(huán)境中DNA的生理狀態(tài),這種狀態(tài)的細(xì)胞被稱作感受態(tài)細(xì)胞。
第四步:目的基因的檢測與鑒定。