T—DNA插入失活技術(shù)是目前使用最為廣泛的植物基因敲除手段，該技術(shù)利用農(nóng)桿菌T—DNA介導(dǎo)轉(zhuǎn)化，將一段帶有報告基因的DNA序列整合到植物基因組DNA上，如果這段DNA插入到靶基因（待敲除基因）內(nèi)部或附近，就會導(dǎo)致靶基因失活?；卮鹣铝袉栴}：
（1）轉(zhuǎn)化是指

目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程

目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程

。使用T—DNA介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的原因是

T—DNA能轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并整合到該細(xì)胞的染色體DNA上

T—DNA能轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并整合到該細(xì)胞的染色體DNA上

。
（2）T—DNA在植物基因組中會發(fā)生隨機(jī)整合，可利用PCR技術(shù)進(jìn)行鑒定。圖1為靶基因（共900bp）部分堿基序列，經(jīng)基因敲除處理后得到的三種植株的靶基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳結(jié)果如圖2。

①PCR時應(yīng)加入依據(jù)靶基因序列設(shè)計的兩種引物，請寫出引物的序列

GACCTG、CAATCC

GACCTG、CAATCC

（每個序列寫出6個堿基即可）。除上述兩種引物外還應(yīng)加入依據(jù)

報告基因

報告基因

序列設(shè)計的一種引物，目的是

確定含報告基因的DNA序列是否插入到靶基因中

確定含報告基因的DNA序列是否插入到靶基因中

。
②已知目標(biāo)植物為二倍體，分析出現(xiàn)圖2中B種情況的原因是

將一對靶基因中的一個基因敲除

將一對靶基因中的一個基因敲除

。