人參皂苷Rh2是人參中重要的活性組分之一，具有抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等功能。我國科研人員以酵母菌為受體細胞，經(jīng)改造獲得Rh2前體物質(zhì)A高產(chǎn)的L菌株?？蒲腥藛T對其繼續(xù)進行基因工程改造，以期獲得人參皂苷Rh2高產(chǎn)的細胞工廠菌株。
（1）相比于植物細胞，選擇酵母菌作為受體細胞的主要優(yōu)勢是：

繁殖快、單細胞真核生物、細胞遺傳物質(zhì)相對較少、易培養(yǎng)、產(chǎn)物含量高、產(chǎn)物易分離

繁殖快、單細胞真核生物、細胞遺傳物質(zhì)相對較少、易培養(yǎng)、產(chǎn)物含量高、產(chǎn)物易分離

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（2）前體物質(zhì)A可依次經(jīng)過P酶和N酶轉(zhuǎn)化為人參皂苷Rh2。科研人員通過

PCR技術(shù)

PCR技術(shù)

方法獲得大量P和N基因片段，然后再用限制酶和

DNA連接

DNA連接

酶處理，將他們連接形成重組DNA片段?？蒲腥藛T將基因編輯質(zhì)粒、引導(dǎo)序列質(zhì)粒和重組DNA片段導(dǎo)入L菌。據(jù)圖1分析，為初步篩選得到成功轉(zhuǎn)入兩種質(zhì)粒的受體菌，需要用

不含尿素和色氨酸

不含尿素和色氨酸

培養(yǎng)基。再通過分子水平技術(shù)確定重組DNA片段整合到L菌染色體上。

（3）科研人員篩選得到成功轉(zhuǎn)化的R菌株，將其與L菌株置于相同條件下培養(yǎng)，發(fā)酵一段時間后檢測人參皂苷Rh2和前體物質(zhì)A的含量，結(jié)果如圖2。據(jù)圖分析，R菌株能

能合成人參皂甙Rh2和前體物質(zhì)A

能合成人參皂甙Rh2和前體物質(zhì)A

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（4）結(jié)合上述研究，在此基礎(chǔ)上進一步提升R菌株生產(chǎn)能力的可行方案是

提取L菌的合成前體物質(zhì)A基因，構(gòu)建基因表達載體并導(dǎo)入R菌內(nèi)，篩選人參皂甙Rh2和前體物質(zhì)A合成量都較高的目的R菌，然后擴大培養(yǎng)

提取L菌的合成前體物質(zhì)A基因，構(gòu)建基因表達載體并導(dǎo)入R菌內(nèi)，篩選人參皂甙Rh2和前體物質(zhì)A合成量都較高的目的R菌，然后擴大培養(yǎng)

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