基因工程的相關(guān)技術(shù)可用于病毒檢測(cè),也可用于制備疫苗。利用熒光PC技術(shù)檢測(cè)是否感染某種RNA病毒時(shí),基本操作流程為:提取病毒的RNA→熒光PCR擴(kuò)增反轉(zhuǎn)錄DNA→熒光檢測(cè)。請(qǐng)回答下列問題:
(1)分離病毒的RNA通常在冰浴條件下進(jìn)行,目的是抑制 RNA酶RNA酶的活性,防止病毒的RNA降解。熒光PCR反應(yīng)體系中需要加入的酶是 反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶,還需加入dATP、dCTP、dGTP、dTTP,其作用是 提供原料和能量提供原料和能量。
(2)熒光染料能摻入DNA雙鏈中發(fā)出熒光,在游離狀態(tài)下不發(fā)出熒光。若檢測(cè)到熒光量達(dá)到某個(gè)臨界值,則代表陽(yáng)性,說明 樣本中含有病毒的RNA樣本中含有病毒的RNA,若檢測(cè)出現(xiàn)“假陰性”現(xiàn)象,原因可能是 病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解。
(3)某病毒的E蛋白和P蛋白會(huì)引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)。構(gòu)建重組活病毒載體疫苗時(shí),獲取該病毒的 E基因和P基因E基因和P基因插入腺病毒的基因組中。重組腺病毒侵染宿主細(xì)胞后,RNA聚合酶RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合啟動(dòng)子,利用宿主細(xì)胞翻譯E蛋白和P蛋白,從而引發(fā)機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】RNA酶;反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶;提供原料和能量;樣本中含有病毒的RNA;病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解;E基因和P基因;RNA聚合酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:6引用:1難度:0.7
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