研究者通過生物技術改造腺病毒成為溶瘤腺病毒,并分析其治療急性髓系白血病(AML)的潛力。
(1)人體多種組織細胞的表面含有腫瘤壞死因子誘導凋亡蛋白(T蛋白),可特異性(識別并)結(jié)合(識別并)結(jié)合腫瘤細胞表面的死亡受體DR4,啟動腫瘤細胞凋亡基因的表達表達,從而誘導其凋亡。
(2)Z蛋白可連接于腺病毒表面,研究者利用PCR技術將Z基因與T基因連接成融合基因。
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將擴增得到Z基因與T基因置于PCR反應體系中高溫變性后,含m、n的DNA單鏈互補配對作為復制的模板和引物模板和引物,在Taq酶Taq酶催化作用下合成融合基因。將融合基因?qū)氪竽c桿菌,獲得融合蛋白。
(3)將融合蛋白與腺病毒(A3)共孵育,得到表面T蛋白含量依次增多的兩類腺病毒:A4、zA4。用病毒感染正常細胞和取自AML患者的腫瘤細胞,得到如圖1、圖2所示結(jié)果。圖1結(jié)果說明腺病毒表面的T蛋白越多,病毒結(jié)合腫瘤細胞的能力越大,但三種病毒均幾乎不結(jié)合正常細胞腺病毒表面的T蛋白越多,病毒結(jié)合腫瘤細胞的能力越大,但三種病毒均幾乎不結(jié)合正常細胞。圖2結(jié)果表明表面連接T蛋白可增強腺病毒對AML患者的腫瘤細胞殺傷力,圖中的對照組是不用腺病毒處理的AML患者的腫瘤細胞不用腺病毒處理的AML患者的腫瘤細胞。
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(4)進一步研究發(fā)現(xiàn),某些AML患者的腫瘤細胞對T蛋白修飾的溶瘤腺病毒不敏感。人參皂甙(Rh2)是人參的主要活性成分,可誘導腫瘤細胞某些基因表達,是有潛力的抗腫瘤藥物。研究者通過實驗證實了Rh2能增強T蛋白誘導腫瘤細胞凋亡的敏感性。請分析腫瘤細胞對T蛋白修飾的腺病毒不敏感的原因以及Rh2可能的作用機理細胞表達的死亡受體DR4較少,使T蛋白無法誘導其凋亡;Rh2通過提高腫瘤細胞表面死亡受體的表達量來提高其對T蛋白的敏感性細胞表達的死亡受體DR4較少,使T蛋白無法誘導其凋亡;Rh2通過提高腫瘤細胞表面死亡受體的表達量來提高其對T蛋白的敏感性。
(5)請評價改造后的溶瘤腺病毒在腫瘤治療上的優(yōu)勢是具有較強的腫瘤靶向能力和效果明顯腫瘤細胞殺傷能力,還可以聯(lián)合使用Rh2提高對不敏感腫瘤的殺傷力具有較強的腫瘤靶向能力和效果明顯腫瘤細胞殺傷能力,還可以聯(lián)合使用Rh2提高對不敏感腫瘤的殺傷力。
【答案】(識別并)結(jié)合;表達;模板和引物;Taq酶;腺病毒表面的T蛋白越多,病毒結(jié)合腫瘤細胞的能力越大,但三種病毒均幾乎不結(jié)合正常細胞;不用腺病毒處理的AML患者的腫瘤細胞;細胞表達的死亡受體DR4較少,使T蛋白無法誘導其凋亡;Rh2通過提高腫瘤細胞表面死亡受體的表達量來提高其對T蛋白的敏感性;具有較強的腫瘤靶向能力和效果明顯腫瘤細胞殺傷能力,還可以聯(lián)合使用Rh2提高對不敏感腫瘤的殺傷力
【解答】
【點評】
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