苯丙酮尿癥是一種單基因遺傳病，由于PKU某因突變導(dǎo)致患者尿液中含有大量苯丙酮酸?；蚨c整合可替換特定某因用于該病治療，即將正常PKU基因定點整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細胞的染色體DNA上，替換突變基因。簡要過程如圖所示。請回答下列問題：
注：圖中neoR為新霉素抗性基因，HB1和HB2為小鼠胚胎干細胞染色體DNA上突變的PKU基因兩側(cè)的一段DNA序列。
（1）構(gòu)建重組載體時，需要根據(jù)HB1和HB2的堿基HB1和HB2的堿基序列分別合成HB1′和HB2′，在二者之間除了插入正常的PKU基因和neoR基因以外，還必須含有啟動子、終止子啟動子、終止子。此過程常用的工具酶有限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶，neoR基因的作用是鑒定與篩選含有正常PKU基因的胚胎干細胞鑒定與篩選含有正常PKU基因的胚胎干細胞。
（2）可用顯微注射顯微注射技術(shù)將重組載體導(dǎo)入小鼠胚胎干細胞，誘導(dǎo)相應(yīng)區(qū)域互換，完成胚胎干細胞的基因改造。胚胎干細胞的特點有能大量增殖；具有發(fā)育的全能性；能大量增殖；具有發(fā)育的全能性；、體積小、細胞核大、核仁明顯；在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生分化體積小、細胞核大、核仁明顯；在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生分化（答出兩點即可）。
（3）現(xiàn)用完成基因改造后的胚胎干細胞進行個體生物學(xué)水平鑒定，寫出鑒定思路、結(jié)果及結(jié)論：將該胚胎干細胞培育成小鼠，檢測小鼠尿液中苯丙酮酸含量，若小鼠尿液中不含大量苯丙酮酸，說明PKU基因成功表達，基因治療成功，反之，則不成功將該胚胎干細胞培育成小鼠，檢測小鼠尿液中苯丙酮酸含量，若小鼠尿液中不含大量苯丙酮酸，說明PKU基因成功表達，基因治療成功，反之，則不成功。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】HB1和HB2的堿基；啟動子、終止子；限制酶、DNA連接酶；鑒定與篩選含有正常PKU基因的胚胎干細胞；顯微注射；能大量增殖；具有發(fā)育的全能性；；體積小、細胞核大、核仁明顯；在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生分化；將該胚胎干細胞培育成小鼠，檢測小鼠尿液中苯丙酮酸含量，若小鼠尿液中不含大量苯丙酮酸，說明PKU基因成功表達，基因治療成功，反之，則不成功
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：5引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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