從自然界中的生物體內(nèi)分離得到的天然酶，在工業(yè)生產(chǎn)環(huán)境中催化效率往往較低。研究人員利用易錯(cuò)PCR技術(shù)對某種天然酶進(jìn)行改造，獲得了高催化效率的酶。易錯(cuò)PCR是利用低保真的Taq酶和改變PCR的反應(yīng)條件，降低DNA復(fù)制的準(zhǔn)確性，在新DNA鏈的合成過程中增加堿基錯(cuò)配，從而使擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)較多點(diǎn)突變的一種體外誘導(dǎo)DNA序列變異的方法。如圖是利用易錯(cuò)PCR改造某種天然酶的流程示意圖?；卮鹣铝袉栴}：

（1）Taq酶的某一區(qū)域負(fù)責(zé)將堿基與模板鏈正確地互補(bǔ)配對，Mn²⁺可以降低這一功能；非互補(bǔ)的堿基對由于氫鍵不易形成，穩(wěn)定性差，Mg²⁺可以提高該錯(cuò)配區(qū)的穩(wěn)定性。因此，與普通PCR相比，易錯(cuò)PCR的反應(yīng)體系中應(yīng)適當(dāng)

提高

提高

（填“提高”或“降低”）Mn²⁺濃度、

提高

提高

（填“提高”或“降低”）Mg²⁺濃度。
（2）圖中步驟①為易錯(cuò)PCR過程，其擴(kuò)增過程包括

變性、復(fù)性、延伸

變性、復(fù)性、延伸

三步。在擴(kuò)增過程中，不需要在每次循環(huán)中重復(fù)加入Taq酶，是因?yàn)門aq酶具有

耐高溫（或在高溫下能保持酎的話性）

耐高溫（或在高溫下能保持酎的話性）

的特點(diǎn)。
（3）圖中步驟②是將構(gòu)建的重組質(zhì)粒溶于緩沖液中與用

Ca²⁺

Ca²⁺

處理的受體菌混合，在一定溫度下完成轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化是指

目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程

目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程

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（4）請闡述通過易錯(cuò)PCR技術(shù)改造天然酶與通過蛋白質(zhì)工程改造天然酶的本質(zhì)區(qū)別。

易錯(cuò)PCR技術(shù)是利用基因突變的原理末改造天然配，是不定向的；而蛋白質(zhì)工程是利用基因重組的原理來改造天然酶，是定向的

易錯(cuò)PCR技術(shù)是利用基因突變的原理末改造天然配，是不定向的；而蛋白質(zhì)工程是利用基因重組的原理來改造天然酶，是定向的

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