超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的獲得與鑒定
在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中,所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖1所示,P蛋白在玉米株系的表達(dá)量如圖2所示。
回答下列問(wèn)題:
(1)強(qiáng)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,能被
RNA聚合酶
RNA聚合酶
識(shí)別并結(jié)合,驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá),應(yīng)優(yōu)先選用
BamHI和SacI
BamHI和SacI
酶組合,將片段和Ti質(zhì)粒切開(kāi)后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是
將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上
將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上
。
(2)將農(nóng)桿菌浸泡過(guò)的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng),培養(yǎng)基中需加入
潮霉素
潮霉素
進(jìn)行篩選,篩選出的愈傷組織
(再)分化
(再)分化
形成叢芽,最終獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因玉米株系。
(3)據(jù)圖2分析,選擇a
1、a
2、a
3玉米株系,作為超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的生理特性研究的實(shí)驗(yàn)材料,理由是
a1、a2、a3玉米株系的P蛋白表達(dá)量顯著高于野生型玉米
a1、a2、a3玉米株系的P蛋白表達(dá)量顯著高于野生型玉米
。