下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：
| 限制酶 | BamHⅠ | HindSⅢ | EcoRⅠ | SmaⅠ |
| 識別序列及切割位點 | G↓GATCC CCTAG↓G |
A↓AGCTT TTCGA↓A |
G↓AATTC CTTAA↓G |
CCC↓GGG GGG↓CCC |
（1）EcoRI斷開的是
鳥嘌呤脫氧核苷酸
鳥嘌呤脫氧核苷酸
和 腺嘌呤脫氧核苷酸
腺嘌呤脫氧核苷酸
之間的 磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
鍵。一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有 0，2
0，2
個游離的磷酸基團。（2）若對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越
高
高
。（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SrnaⅠ切割，原因是
會破壞質(zhì)粒中的標記基因和外源DNA中的目的基因
會破壞質(zhì)粒中的標記基因和外源DNA中的目的基因
。（4）與只使用EcoR I相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以實現(xiàn)
目的基因和質(zhì)粒的定向連接
目的基因和質(zhì)粒的定向連接
。BamHⅠ切割DNA后形成的是 黏性
黏性
末端，寫出該末端 -CTAG或GATC-
-CTAG或GATC-
。（5）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了
鑒別和篩選含有目的基因的受體細胞
鑒別和篩選含有目的基因的受體細胞
。如果是四環(huán)素抗性基因，可以在培養(yǎng)基中加 四環(huán)素
四環(huán)素
來幫助實現(xiàn)該作用。（6）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在
四環(huán)素
四環(huán)素
的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】鳥嘌呤脫氧核苷酸；腺嘌呤脫氧核苷酸；磷酸二酯鍵；0，2；高；會破壞質(zhì)粒中的標記基因和外源DNA中的目的基因；目的基因和質(zhì)粒的定向連接；黏性；-CTAG或GATC-；鑒別和篩選含有目的基因的受體細胞；四環(huán)素；四環(huán)素
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：6引用：1難度：0.7
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